5L kontinuálny prietokový termostatický ultrazvukový homogenizátor Sonicator

Aplikácia ultrazvukového homogenizátora Sonicator v Streptomyces

Otázka: Aké sú podmienky pre ultrazvuku Streptomyces?

Odpoveď: Predbežná úprava je vo všeobecnosti konfigurovaná ako koncentrácia bakteriálnej suspenzie. Ultrazvukové prerušenie sa uskutočnilo pomocou ultrazvukových bunkových drvidiel. Špecifické podmienky prijaté v tejto dobe sú nasledovné:

1. Bakteriálne 24 h kultivačné médium sa centrifugovalo pri 5 000 r / min počas 5 minút, aby sa bunky zhromaždili.

2. 3-krát sa premyje pufrom Na2HPO-NaH2PO pH 7,5 a potom sa tento pufor premieša do suspenzie 1: 3. Umiestnili sa do 40 ml veľkej plastovej skúmavky.

3. Umiestnite veľkú plastovú skúmavku do ľadového kúpeľa a použite ultrazvuku na rozbitie (výkon 200 W, 1/2 "sonda, drvenie 30 s, prerušované 30 S).

4. Rozdrvená kvapalina sa centrifugovala rýchlosťou 12 000 r / min počas 30 minút pri vysokej rýchlosti, aby sa zhromaždili zvyšky buniek a supernatant. Postup pri rozrušení ultrazvukom bol v zásade rovnaký ako vyššie, to znamená, že premyté bunky môžu byť tiež predchladené fyziologický soľný roztok alebo pH 8 Tris. -HCl, raz sa umyje. Okrem toho sa dávka ultrazvuku značne líši podľa množstva vzorky a baktérií. Výkon môže dosiahnuť 400-600 W, presiahnuť 5 s, zastaviť po dobu 5 s, ľadový kúpeľ a pridať PMSF s konečnou koncentráciou 1 mM. Na stanovenie príslušnej intenzity a frekvencie ultrazvuku je potrebné kedykoľvek pozorovať mikroskopické vyšetrenie, aby sa zistilo, či sú bunky úplne zlomené. Actinomycety patria do rodu grampozitívnych baktérií s vysokým (G + C) molárnym percentom (mol%) na phylogenetickom strome prokaryotických systémov. Pri ultrazvuke E. coli sa používa pulverizačný prístroj s ultrazvukovými článkami o veľkosti 400 W a spôsob Super 5 stop 5 je dobrý, ale zdá sa, že nemá účinok na Streptomyces. Bude to spôsobené rozdielmi v zložení bunkovej steny, pretože E. coli je Gram-negatívna baktéria.

Preudct Photo